Fertilidad tras los transplantes de ovarios intactos

Los bancos de órganos completos criopreservados para transplantes empiezan a parecer factibles

La cirugía de trasplantes, que está limitada por el suministro y la viabilidad a corto plazo de órganos frescos, sería revolucionada si éstos pudiesen sobrevivir la congelación, pero los anuncios de criopreservación¹ realizados hasta el momento han sido refutados. Aquí describimos el trasplante exitoso en ratas de ovarios, de trompas de Falopio y del segmento superior del útero, en bloque, después de preservarlos en nitrógeno líquido.

Anestesiamos ratas de Lewis hembra adultas usando pentobarbital sódico y quitamos el ovario derecho y el tracto reproductivo, con los vasos sanguíneos ováricos diseccionados para crear ... de la aorta y de la vena cava^2,3 ; estas preparaciones fueron mantenidas en una solución durante menos de una hora antes del trasplante. Los receptores fueron anestesiados, ... Después de pares de operaciones que duraron 2 h, la circulación fue restaurada a los órganos donantes (para más detalles ver la información suplementaria). Todos los receptores supervivientes estaban sanos.

Utilizamos ocho órganos frescos para el trasplante y también siete tratados que habíamos perfundido durante 30 min a 0,35 ml min ^-1 con un medio M2 que contenía fructosa 0,1 M y concentraciones crecientes de dimetilsulfoxido (0-1.5 M). Siguiendo un protocolo usado previamente para secciones de tejido ovárico⁴, enfriamos lentamente los órganos tratados en contenedores criogénicos (Nalgene) de 5-ml, induciendo la nucleación del hielo a -7 ºC en el compartimiento modificado de un congelador automatizado (CryoLogic). Después de almacenarlos durante la noche en nitrógeno líquido, descongelamos rápidamente los frascos y eliminamos el crioprotector mediante perfusión con un gradiente de concentración invertido (para más detalles ver la información suplementaria).

Supervisamos la función ovárica realizando citologías vaginales (ver la información suplementaria) y apareando algunos animales con sementales cuatro semanas más tarde. Diez semanas después de la cirugía, recogimos sangre inmediatamente después de la eutanasia para medir las concentraciones en el suero de la hormona estimulante del folículo (FSH) y de estradiol-17ß por radioinmunoanálisis y quimioluminescencia, respectivamente. Preparamos los órganos para la histología y para determinar las reservas ováricas de folículos.

Todos los animales con trasplantes frescos reiniciaron el estro. Tenían números normales de folículos ováricos, incluyendo las etapas ... , y los pesos uterinos y los niveles de FSH eran similares a los de los de control (9.7±0,5 y 9.1±0.4 ng ml^-1, respectivamente). Cuatro animales con injertos criopreservados (el 57%) tenían ovarios con folículos, y su cuerpo lúteo indicaba la ovulación reciente. Un animal estaba embarazado, con dos fetos sanos implantados a ambos lados del anastomosis uterino. Este grupo tenía niveles más altos de FSH en el suero (21,3±6.2 ng ml^-1), menos folículos, niveles más bajos de estradiol y pesos uterinos inferiores, pero ningún animal podía considerarse en nivel de castración. La morfología del útero y de las trompas era indistinguible de la de los controles no operados.

Estos resultados dan ánimo, pero indican que la función ovárica se ve comprometida hasta cierto grado por la congelación, quizás debido a la formación de hielo intravascular --un problema que ha frustrado previamente tentativas de criopreservar riñones⁵. Los avances en vitrificación pueden superar este problema si la toxicidad química de los crioprotectores se redujese al mínimo⁶. Los bancos de órganos reproductivos congelados podrían ser útiles en la cría de especies en peligro y como opción de recuperación de la fertilidad para mujeres y niños que han sido sometidos a quimioterapia esterilizante^7,8. Nuestro éxito con los trasplantes ováricos debería estimular la investigación en la mejora de las técnicas de criopreservación para otros órganos.

Xiang Wang *, Huifang Chen *, Caída Yin†, S. Samuel Kim‡, Seang Lin Tan†, Roger G. Gosden†

*Laboratory of Experimental Surgery, Centre Hospitalier de l’Université de Montréal, Notre-Dame Hospital, Montreal, Quebec H2L 4M1, Canada

†Department of Obstetrics and Gynecology, McGill University, Royal Victoria Hospital, Montreal, Quebec H3A 1A1, Canada e-mail: gosdenrg@evms.edu

1. Guttman, F. M. et al. Cryobiology 14, 559-567 (1977).
2. Lee, S. J. Res. Inst. Sci. Korea 6, 112 (1974).
3. Cornier, E., Sibella, P. & Chatelet, F. J. Gynécol. Obstet. Biol. Reprod. 14, 567-573 (1985).
4. Gosden, R. G. et al. Hum. Reprod. 9, 597-603 (1994).
5. Jacobsen, I. A. et al. Cryobiology 21, 637-653 (1984).
6. Song, Y. C. et al. Nature Biotechnol. 18, 296-299 (2000).
7. Picton, H. M., Kim, S. S. & Gosden, R. G. Br. Med. Bull. 56, 603-615 (2000).
8. Radford, J. A. et al. Lancet 357, 1172-1175 (2001).

Hay información suplementaria sobre este trabajo en el sitio de nature (www.nature.com).

Revisado: 20/02/2002 .

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